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关于动物细胞株工艺开发经验分享
发布时间:2022-10-22   点击次数:100次
   动物细胞株大规模培养技术是指以生物反应器培养细胞为基础,实现动物细胞工业化和规模化生产,用于生产疫苗、单抗等生物制品。为提升生物制品的生产效率,保证产品质量,动物细胞大规模培养过程工艺需考虑高表达工程细胞系、个性化细胞培养基的应用、生物反应器工艺优化等。
  
  目前,上千升规模的生物反应器做国内应用也越来越广泛,如何实现生产工艺放大是首先要考虑的,涉及生物反应器高径比,剪切力(通气方式、桨叶设计),通气获得DO效率(与搅拌系统、通气方式、气体流量),积累CO2的排出等内容,而这些因素往往是非线性放大的,这与生物反应器设备的设计、放大的关系最为密切。DO、pH、Temp、培养基流加策略等则是线性放大的。生物反应器工艺放大的困难往往在于这些非线性放大因素。
  
  关于动物细胞株工艺开发,有几条经验可考虑:
  1、pH控制
  高pH值的培养条件,即偏碱环境更容易导致乳酸生成。在流加培养时,可根据葡萄糖消耗速率添加葡萄糖,一般控制培养液中的葡萄糖浓度高于1-2.5g/L。同时控制合适的DO浓度,DO不足时细胞无氧代谢,不走TCA循环,导致乳酸产生。在不补加碱液的时候,pH的变化,一定程度上也可用于细胞生长状态的评价。
  
  2、DO控制
  细胞从接种到收获,随着细胞密度或细胞状态的变化,对溶氧的需求是一个由弱到强,再至稳定,然后减少的变化过程。基于一定细胞密度下的溶氧消耗速率,是衡量细胞生长、细胞代谢,甚至是细胞生理状态的重要指标。DO值的高低,能影响蛋白的糖基化等转录后修饰。
  
  3、CO2排出
  在高密度培养细胞时,反应器内CO2的积累往往成为一个问题,其通过影响培养环境的pH值、渗透压对培养过程产生影响。小孔径的通气管,能提高通气效率,但排CO2效率低;而大孔径的通气管,通气效率降低,但驱赶CO2效果好。所以在生物反应器设计时,需要综合考虑。
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